
在生物制藥領(lǐng)域,細(xì)胞株開發(fā)(CLD)是生物制品研發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而單細(xì)胞克隆(SCC)作為生成穩(wěn)定蛋白生產(chǎn)細(xì)胞系的重要步驟,卻面臨著勞動密集和耗時的挑戰(zhàn)。優(yōu)化 SCC 流程,對于加速新生物制品的上市進(jìn)程、降低成本具有深遠(yuǎn)意義。過去幾十年,治療性生物制品市場迅速增長,預(yù)計(jì)2025年全球市場收入將達(dá)約3000億美元,其中單克隆抗體(mAb)占比頗高[1]。哺乳動物細(xì)胞,尤其是CHO細(xì)胞系,因易于培養(yǎng)、產(chǎn)量高、翻譯后修飾有效、人源兼容且獲FDA批準(zhǔn)等優(yōu)勢,成為生物制品生產(chǎn)的主流細(xì)胞系。
細(xì)胞周期(cell cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段,其中間期又分為三個階段:G1、S和G2,如果細(xì)胞在G1期受到調(diào)控阻留,則會轉(zhuǎn)入G0期脫離細(xì)胞周期,在G0期的細(xì)胞仍然有進(jìn)入細(xì)胞周期分裂的潛力。
DNA鏈間交聯(lián)是DNA損傷的一種重要表現(xiàn)形式,交聯(lián)的存在,抑制了DNA正常的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄功能,因此可以誘發(fā)腫瘤等多種嚴(yán)重性疾病的發(fā)生。
質(zhì)量光度法(MP)可量化溶液中生物大分子的質(zhì)量分布。它在分析生物樣本的純度、完整性和原始條件下的功能方面的用途已經(jīng)被證明,在本應(yīng)用說明中,將證明質(zhì)量光度法在變性條件下,是研究低聚蛋白質(zhì)變性和再變性的有用工具。
除了蛋白質(zhì)的經(jīng)典功能(例如充當(dāng)生物催化劑或結(jié)合partner)之外,還需要考慮蛋白質(zhì)的構(gòu)象狀態(tài)及其在刺激下的重塑。經(jīng)歷全面構(gòu)象重塑的蛋白質(zhì)的一個突出例子是轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶 2 (TGase 2),其不同的構(gòu)象狀態(tài)與特定功能密切相關(guān)。
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